840
Tom 68 · nr 12 · 2012
zróżnicowania (stacjonarne kultury kalusowo-pę-
dowe i niezróżnicowane kultury kalusowe), bada-
no zdolność akumulacji dwóch lignanów – schizan-
dryny (schizandrol A) i gomisyny A (schizandrol B).
Kultury kalusowo-pędowe prowadzono na sześciu
wariantach podłoża Murashige’a i Skooga (M-S) za-
wierających różne stężenia regulatorów wzrostu
i rozwoju roślin: auksynę (NAA) i cytokininę (BAP).
Zawartość obu lignanów w metanolowych ekstrak-
tach z biomasy hodowanej in vitro była zróżnico-
wana i zależna od stężenia regulatorów wzrostu.
Maksymalne stwierdzone zawartości schizandro-
lu A (70,54 mg%) i schizandrolu B (86,41 mg%)
były znaczne w porównaniu z ich zawartością w eks-
traktach z organów roślin rosnących in vivo anali-
zowanych w celach porównawczych: liście (odpo-
wiednio 29,69 i 34,50 mg%), owoce (odpowiednio
132,39 i 106,40 mg%). Kultury kalusowe prowa-
dzono na dwóch z testowanych wariantów podło-
ża M-S. Zawartość oznaczanych lignanów w tym
materiale była niska, maksymalne zawartości schi-
zandrolu A i schizandrolu B wynosiły odpowiednio
2,16 i 2,66 mg% [50]. Wyniki te potwierdziły zna-
ną zależność wpływu stopnia zróżnicowania bioma-
sy hodowanej in vitro na akumulację metabolitów
wtórnych [67].
Analizę lignanów wzbogacono w kolejnym eta-
pie o badania nad akumulacją deoksyschizandryny.
Zawartość tego związku w ekstraktach z biomasy
kultur kalusowo-pędowych była również zależ-
na od stężeń NAA i BAP w podłożach M-S, zróżni-
cowana od 34,23 do 308,51 mg%. W ekstraktach
z kalusa zawartość deoksyschizandryny wynosi-
ła 18,20 mg%. Maksymalne zawartości tego lig-
nanu uzyskane w materiale z kultur in vitro były
około 7-krotnie wyższe niż w ekstraktach z liści
(41,01 mg%) i około 5-krotnie wyższe niż w eks-
traktach z owoców (60,72 mg%) [76].
Uzyskane wyniki badań wskazują na poten-
cjalną użyteczność założonych kultur kalusowo-
-pędowych jako źródła pozyskiwania terapeutycz-
nie ważnych lignanów.
Tożsamość oznaczanych trzech lignanów, po
ich wyizolowaniu i oczyszczeniu metodami chro-
matograficznymi, potwierdzono analizą spektral-
ną (
1
H-NMR) [76].
Uwzględniając niezwykle cenne właściwości bio-
logiczne kwasów fenolowych w hodowanej w kul-
turach stacjonarnych biomasie, badano zdolność
akumulacji tej grupy związków. Spośród jedena-
stu oznaczanych wolnych kwasów fenolowych
stwierdzono obecność sześciu: kwasu chloroge-
nowego, p-hydroksybenzoesowego, p-kumaro-
wego, protokatechowego, salicylowego i syryngo-
wego. W kulturach kalusowo-pędowych całkowita
zawartość tej grupy metabolitów także była zależ-
na od stężeń regulatorów wzrostu w podłożach ho-
dowlanych, zróżnicowana od 14,90 do 60,05 mg%.
Dominującymi ilościowo związkami w tym mate-
riale były: kwas chlorogenowy (maks. 22,60 mg%)
i kwas salicylowy (maks. 21,17 mg%). W kultu-
rach kalusowych prowadzonych na dwóch wa-
riantach podłoża M-S, całkowita zawartość kwa-
sów fenolowych była wyższa, równa odpowiednio
74,54 i 78,24 mg%. Głównymi związkami były
kwas chlorogenowy (maks. 38,43 mg%) i kwas
protokatechowy (maks. 20,95 mg%). Całkowita za-
wartość wolnych kwasów fenolowych w ekstrak-
tach z owoców była znaczna (58,08 mg%), w eks-
traktach z liści niska (4,79 mg%). Oznaczenia tej
grupy metabolitów zarówno w materiale z kultur
in vitro, jak i w organach roślin rosnących w wa-
runkach naturalnych zostały przeprowadzone po
raz pierwszy przez mgr farm. A. Szopa w Zakładzie
Botaniki Farmaceutycznej UJ CM [77].
Analogiczne badania nad akumulacją ligna-
nów i kwasów fenolowych w kulturach wytrzą-
sanych są w toku (
ryciny 5, 6
). Sprawdzana jest
powtarzalność uzyskanych wstępnych wyni-
ków [78, 79]. Wstępne wyniki badań wskazują,
Rycina 5.
Wytrząsane kultury pędowe Schisandra chinensis
(fot. Agnieszka Szopa)
Rycina 6.
Wytrząsane kultury zawiesinowe Schisandra
chinensis (fot. Agnieszka Szopa)